노화 방지를 위한 먹는 콜라겐 음료 : 항산화, 콜라겐 합성 촉진, 인간 피부 섬유 아세포의 단백질 접힘 및 DNA 복구 개선

요약

이 작품은 피부 노화 개선을위한 생선 콜라겐 음료를 공개합니다. 이전 연구에서는 콜라겐 손실의 대표적인 특성과 단백질 분해 효소 매트릭스 메탈 로프 로테이나 아제 (MMP)의 산화 유도 발현 각도에서 피부 노화를 자주 논의했지만, 소수의 그룹에서 단백질 폴딩 및 DNA 복구를 향상시키는 경구 가수 분해 콜라겐의 효능을 종합적으로 조사했습니다.

주목할만한 세포 행동을 개선합니다. 피부 노화 지연에 대한 광범위한 관점을 설명하기 위해, 우리는 분자 및 세포 측면에서 콜라겐 음료 처리 섬유 아세포 세포를 조사했습니다. 결과는 콜라겐 음료가 ROS 억제, 세포 외 기질 (ECM) 단백질 합성 촉진, 미토콘드리아 활성 증가에 대한 컴팩트 한 노화 방지 효과를 수행 할 수 있음을 보여줍니다.

및 정확한 단백질 폴딩, DNA 미스 매치 복구 (MMR) 및 염기 절제 복구 (BER)에 관한 유전자 발현의 개선. 실험 결과는 세포 모델을 기반으로하지만, 우리는 긍정적 인 결과가 노화 방지를위한 구강 가수 분해 콜라겐 보충제의 영향에 대한 자세한 내용을 제공 할 수 있다고 믿습니다.

 요컨대, 콜라겐 음료의 시너지 효과가 산화 손상을 감소시킬뿐만 아니라 세포 기능을 개선하여 UVA에 의해 유발되는 유해한 영향을 보상 할 수 있음을 성공적으로 입증했습니다. 우리는 긍정적 인 결과가 노화 방지에 대한 구강 가수 분해 콜라겐 보충제의 영향에 대한 자세한 내용을 제공 할 수 있다고 믿습니다. 요컨대, 콜라겐 음료의 시너지 효과가 산화 손상을 감소시킬뿐만 아니라 세포 기능을 개선하여 UVA에 의해 유발되는 유해한 영향을 보상 할 수 있음을 성공적으로 입증했습니다.

 우리는 긍정적 인 결과가 노화 방지에 대한 구강 가수 분해 콜라겐 보충제의 영향에 대한 자세한 내용을 제공 할 수 있다고 믿습니다. 요컨대, 콜라겐 음료의 시너지 효과가 산화 손상을 감소시킬뿐만 아니라 세포 기능을 개선하여 UVA에 의해 유발되는 유해한 영향을 보상 할 수 있음을 성공적으로 입증했습니다.

1. 소개

콜라겐은 인체 단백질 구성의 약 30 %를 차지하며 결합 조직, 즉 피부, 혈관 및 연골에서 우세한 단백질입니다

[ 1 ]. 엘라스틴, 히알루로 네이트 (HA) 및 프로테오글리칸과 결합 된 콜라겐은 ECM을 형성하여 세포에 기계적 특성과 세포 안정화 또는 기능화를위한 분자 신호를 부여합니다

 [ 2 ]. 다른 기관과 달리 피부는 환경에 직접 노출되며 그 외형은 전반적인 노화 과정의 전형을 나타냅니다

 [ 3 ]. 피부 노화는 일반적으로 주름, 이완, 갈색 반점, 두꺼워 짐 및 거칠어 짐이 특징이며, 이러한 악화는 ECM 단백질의 분해 및 고급 당화 최종 산물 (AGE)의 축적과 관련이 있습니다.

4 , 5 ]. 콜라겐 I 형과 III 형은 피부 구성의 약 95 %를 차지하며 피부 속성의 탄력, 강도, 내구성 및 탄력성을 담당합니다

[ 1 , 6 ]. 시간이 지남에 따라 노화로 인해 매년 콜라겐 함량이 1 % 감소합니다

 [ 7 ]. 연대기 노화는 주로 콜라겐과 엘라스틴 합성의 약화에 기인하는 반면, 외인성 노화는 콜라겐 섬유가 무질서 해지고 무질서한 엘라스틴 단편화가 축적됩니다

 [ 8]. 여러 연구에서 오래된 피부는 젊은 피부에 비해 I 형 프로 콜라겐의 낮은 발현 수준과 콜라게나 아제 기질 금속 단백 분해 효소 (MMP)의 상향 조절을 나타냅니다

 [ 9 , 10 ]. 외부 노화는 종종 자외선 조사, 부적절한 생활 방식 및 환경 오염 물질과 관련이 있습니다

 [ 11 ]. 이러한 유해 요인 중 UVA (314-400nm), UVB (290-320nm) 및 UVC (100-280nm)를 포함한 UV 조사는 조기 피부 노화 (광노화)의 주요 원인이며 직접적인 DNA로 이어집니다. 거대 분자 (예 : 지질, 단백질 및 DNA)에 대한 손상 또는 UV 유발 산화 손상

[ 12]. 예를 들어, 활성 산소 종 (ROS)은 DNA 염기 디 옥시 구아노 신을 공격하여 8- 옥소 구아닌 및 GC-TA 전이 돌연변이

 [ 13 ] 의 돌연변이 유발을 일으킬 수 있습니다 . UV 조사에 15 분간 노출 된 후 사람의 피부에서 ROS 수준이 크게 증가한 것으로 나타났습니다

[ 14 ]. UV 매개 ROS는 AP-1의 핵 전사 인자 및 활성화 된 B의 핵 인자 kappa-light-chain-enhancer (NF- κ B)

[ 15 ] 와 관련된 신호 경로를 활성화 할 수 있습니다 . AP-1 및 NF- κ B 캐스케이드는 MMP 유전자 (예 : MMP-1, MMP-3)의 발현을 향상시키고 콜라겐 합성을 억제합니다

 [ 16 ]. 또한 NF- κB는 염증성 사이토 카인 (예 : 종양 괴사 인자 -α (TNF- α ), 인터루킨 (IL) -1, IL-6 및 IL-8)과 접착 분자 (예 : 세포 간 접착 분자- 1 (ICAM-1))

[ 17 ].가수 분해 된 콜라겐의 경구 보충은 ECM 단백질의 형성을 촉진하고, UV에 의한 노화를 늦추고, 섬유 아세포 증식을 개선하는 데 유용합니다

 [ 18 – 20 ]. 저 분자량 (0.3-8 kDa)의 작은 펩타이드 인 가수 분해 콜라겐은 장에 쉽게 흡수되고 조직에 사용할 수 있습니다

 [ 21 ]. 콜라겐 합성 촉진을위한 기본 메커니즘은 두 가지 측면으로 나눌 수 있습니다. 섬유 아세포는 콜라겐, 엘라스틴, HA의 분비를 촉진합니다 [ 1]. 육지 동물의 콜라겐 공급원 외에도 최근 어류 폐기물 (예 : 뼈와 비늘) 및 고유 한 아미노 펩타이드

[ 22 ] 의 가용성을 고려하여 어류 콜라겐이 여러 응용 분야에서 강조되었습니다 . 수많은 세포, 동물 및 임상 연구에서 가수 분해 된 어류 콜라겐이 콜라겐 합성의 효율성을 높이고, MMP 발현을 억제하고, 피부 지수 (예 : 수분, 주름 등) 를 개선하여 피부 노화 과정을 방지 할 수 있음을 확인했습니다 . )

 [ 21 – 24]. 그러나 우리가 아는 한, ROS 억제, 콜라겐 및 엘라스틴 생성 촉진, 가장 중요한 것은 가수 분해 콜라겐 제품의 단백질 폴딩 및 DNA 복구 개선과 관련된 노화 방지에 대한 포괄적 인 견해를 언급 한 보고서는 거의 없습니다. 여기에서,이 연구 는 피부 노화에서 생선 콜라겐의 이점을 더 잘 이해하기 위해 이러한 지수에 대한 상대적으로 간단한 시험 관내 분석을 보여줍니다 .

2. 재료 및 방법

2.1. 재료 및 악기

엘라스틴 콜라겐 펩타이드 복합 주스 음료 (YAMII, Zhejiang Kazman Biotechnology Co., China); 성분 : 물, 생선 콜라겐 펩타이드 분말 (12 %), 바나나 가루, 사과 에센스, 체리 에센스, γ- 아미노 부티르산, 포도 가루, 알마 가루, 아사이 가루, 들깨 가루, 엘더베리 가루, 현미 가루, 꿀, 비타민 C, 에리트 리톨, 구연산, 과당 시럽, 자당, 향료), 인간 피부 섬유 아세포 (CCD-966Sk; ATCC®, CRL-1881), 최소 필수 10 % FBS, 1 % 페니실린 / 스트렙토 마이신 및 1mM 나트륨 피루 베이트 (Gibco), 3- (4,5- 디메틸 티아 졸 -2- 일) -2,5- 디 페닐 테트라 졸륨 브로마이드 (MTT, Amresco), 인산염 완충액이 포함 된 배지 생리 식염수 (PBS, 깁코), DMSO (ECHO), 콜라겐 에세이 키트 (Sircol), 미토콘드리아 막 전위 검출 키트 (BD), 2 , 7 -dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA, Sigma-Aldrich), 엘라스틴 분석 키트 (Biocolor), RNA 추출 키트 (Genaid Biotech), nCounter® 플랫폼 (NanoString Technologies), 유세포 분석 (BD) ELISA 리더 (BioTek).

2.2. 세포 생존력 분석

CCD-200 세포 966Sk  μ L 배양액은 24 시간 동안 96- 웰 플레이트에서 배양하고 37 ° C의 각 웰에 분산시켰다. 배지는 0 %, 0.125 %, 0.25 % 또는 0.5 % 콜라겐 음료가 포함 된 신선한 배지로 교체되었습니다. 24 시간 배양 후, 세포를 UVA (10 J / cm ² ) 하에 조사 하였다 . UVA 복용량은 다른 관련 연구에 의해 참조되었습니다 [ 25 ]. 이어서, 15  μ L MTT (4 ㎎ / ㎖)을 4 시간 반응을 각 웰에 첨가 하였다. 그 후 용액을 제거하고  50μL DMSO를 각 웰에 첨가하여 10 분 내에 포르 마잔 결정을 용해시켰다. 흡수 결과 (570 nm에서)는 ELISA 판독기로 기록되었습니다.

2.3. 콜라겐 분석

0.5 mL 배양 배지의 CCD-966Sk 세포를 24 웰 플레이트의 각 웰에 첨가 한 다음 24 시간 배양 하였다. 그런 다음 FBS가없는 배지에서 배지를 0 %, 0.125 %, 0.25 % 또는 0.5 % 콜라겐 음료로 교체 한 후 UVA (10 J / cm ² ) 처리를 수행했습니다. 48 시간 배양 후, 콜라겐 분석에 의한 콜라겐 함량의 추가 분석을 위해 웰로부터 세포를 수집 하였다.

2.4. 미토콘드리아 막 잠재력

2 mL 배양 배지의 CCD-966Sk 세포를 6- 웰 플레이트의 각 웰에 첨가 한 다음 24 시간 배양 하였다. 그런 다음 배지를 배지에 준비된 0 %, 0.125 %, 0.25 % 또는 0.5 % 콜라겐 음료로 교체했습니다. 24 시간 배양 후, 배지를 제거하고 세포를 PBS로 두 번 헹구었다. 그 후, 트립신 분해 후 1.5 mL 미세 원심 분리 튜브에 세포를 수집하고 원심 분리 하였다. 상청액을 폐기하고, 100  μ L JC-1 염료 용액 (키트 프로토콜에 의해 언급 된 바와 같이 염색 조제) 튜브에 피펫 팅하고 15 분 세포와 상호 작용. 결국, 염료 용액을 제거하고 세포를 500 μL에 재현 탁했습니다. 2 % FBS가 포함 된 L PBS. 마지막으로, 세포는 형광 분석을 위해 유세포 분석에로드되었습니다.

2.5. ROS 분석

2 mL 배지의 CCD-966Sk 세포를 6- 웰 플레이트의 각 웰에 첨가하고 24 시간 배양 하였다. 그런 다음 배지를 0 %, 0.25 % 또는 0.5 % 콜라겐 음료로 교체하고 1 시간 동안 배양했습니다. 이후, 10  μ g / DCFH-DA (a ROS 표시기) 용액 ㎖를 각 웰에 15 분 동안 대기에 첨가 하였다. 그 후, 10 J / cm ² UVA 조사 (10 J / cm ² ) 하에 세포를 조사 하였다 . 마지막으로 트립신을 사용하여 세포를 수집하고 현탁 세포를 세포 계측법 (예 : 450-490 nm; Em : 510-550 nm)에로드했습니다.

2.6. 엘라스틴 분석

2 mL 배지의 CCD-966Sk 세포를 6- 웰 플레이트의 각 웰에 분산시키고 24 시간 동안 배양 하였다. 그 후, 배지를 0 %, 0.125 %, 0.25 % 또는 0.5 % 콜라겐 음료로 교체 한 후 UVA (10 J / cm ² ) 처리를하였습니다. 48 시간 배양 후 트립신을 사용하여 세포를 수집하고, 세포의 엘라스틴 수준을 엘라스틴 분석 키트로 분석 하였다.

2.7. mRNA 발현 분석

CCD-966Sk 세포 (10 J / cm ² UVA로 처리 / 처리하지 않고 0.25 % 또는 0.5 % 콜라겐 음료를 포함하는 2mL 배지)를 6 웰 플레이트의 각 웰에 분산시키고 24 시간 동안 배양했습니다. 그런 다음 nCounter® 플랫폼을 통해 mRNA 발현 수준을 분석하고 프로토콜의 권장 사항에 따라 작업을 수행했습니다.

2.8. 통계 분석

모든 측정 결과는 GraphPad Prism에서 분산 분석 (ANOVA) 및 사후 테스트 로 분석되었습니다 . 중요한 차이로 간주되었습니다.

3. 결과 및 고찰

3.1. 세포 생존력

테스트 전에 콜라겐 음료 0.125 %, 0.25 % 및 0.5 %를 준비하고 섬유 아세포에 대한 등장 성을 확인하려고했습니다 (그림 S1 ). 우리는 대조군과 실험군 간의 형태 학적 비교에 의한 증거로서 음료에서 CCD-966Sk 세포에 대한 삼투압의 해로운 영향을 발견하지 못했습니다.

그림 1 은 다양한 농도의 콜라겐 음료 (UVA 조사 유무)로 처리 한 후 섬유 아세포의 세포 생존력 결과를 보여줍니다.

콜라겐 음료의 0.125 %, 0.25 % 및 0.5 %는 대조군에 비해 세포 증식 능력을 약간 향상 시켰으며 세포 성장에 해로운 영향을 미치지 않았습니다

 (그림 1 (a)).). 또한 콜라겐 음료의 영향과 UVA 효과를 평가하기 위해 UVA 처리가 연구에 도입되었습니다 (샘플 처리 후). 일부 연구에서는 UVA가 피부 속으로 UVB보다 더 깊게 침투 할 수 있다는 점을 강조하고 (UVA : 진피에 20-30 %, UVB : 진피에 10 %) UVB 대신 UVA를 광노화 유도 소스로 사용했습니다.

피부의 심오한 광노화 과정 조사 [ 26 ]. 콜라겐 음료의 0.125 %, 0.25 % 및 0.5 %는 UVA 그룹에 비해 UVA 처리 된 섬유 아세포의 세포 생존율 수준을 각각 7.9 %, 22.3 % 및 28.1 % 증가시킬 수 있습니다

 (그림 1 (b)).). 개선은 용량 의존적 효과를 나타내지 만, 가장 높은 농도 만이 현저한 개선을 나타냈다. 또한 세포 회복 과정과 다소 닮은 콜라겐 음료 처리 단계 이전에 UVA로 처리 한 섬유 아세포와 UVA와 콜라겐 음료를 동시에 처리 한 섬유 아세포의 결과에 대해 궁금해했습니다

(그림 S2 ). 샘플 처리에 앞서 섬유 아세포를 UVA로 처리하는 동안, 세포 생존율의 개선은 콜라겐 음료의 농도 증가와 역의 상관 관계가 있었다

(도 S2A ). 그 결과 높은 수준의 함량이 세포 수리의 효율성을 저해하고 결국 증식 능력을 손상 시켰기 때문일 수 있습니다. 반면에, 처리 결과는 그림과 유사했습니다.1 (b) (그림 S2A ). 이것은 콜라겐 음료에서 용질의 흡광도 때문일 수 있습니다.

(ㅏ)
(비)
(ㅏ)
(비)

더욱이, 우리는 콜라겐 음료 및 / 또는 UVA로 처리 한 후 섬유 아세포의 상세한 세포 활동을 조사하기 위해 미토콘드리아 분석을 활용했습니다 (그림 2 , S3). 대조군과 비교하여 콜라겐 음료의 0.125 %, 0.25 %, 0.5 %는 섬유 아세포의 미토콘드리아 활동을 각각 30.6 %, 16.4 %, 36.1 % 증가시킬 수 있습니다.

광노화 개선과 관련하여 UVA 처리 된 세포의 미토콘드리아 활성은 각각 100.9 %, 110.2 %, 105.4 % 개선되었으며, 콜라겐 음료의 0.125 %, 0.25 %, 0.5 %로 처리되었습니다.

 따라서 콜라겐 음료는 원래 및 UVA 처리 된 섬유 아세포에서 미토콘드리아 막 잠재력을 현저하게 향상시킵니다.

이러한 결과를 바탕으로 콜라겐 음료는 세포 생존력을 실질적으로 향상시키고 섬유 아세포의 미토콘드리아 활동을 촉진시킬 수 있습니다.

그림 2 섬유 아세포의 미토콘드리아 활동 결과. CCD-966Sk 세포를 24 시간 동안 0 %, 0.125 %, 0.25 % 또는 0.5 %로 처리 한 후 UVA 관련 그룹에 대해 UVA 처리 (10 J / cm ² )를 처리했습니다. (, ) (통제 그룹에 해당 : ; UVA 그룹에 해당 :).

3.2. 콜라겐과 엘라스틴 합성

우리는 48 시간 동안 다양한 농도의 콜라겐 음료로 처리 된 섬유 아세포에서 콜라겐과 엘라스틴 생산 촉진 효과를 추가로 평가했습니다. 배양 설정은 CCD-966Sk 세포에서 세포 콜라겐 및 엘라스틴 분비에 대한 독특한 관찰을 허용했습니다.

콜라겐 음료의 0.125 %, 0.25 % 및 0.5 %는 대조군에 비해 섬유 아세포의 상대적인 콜라겐 생성 수준을 각각 11.1 %, 17.9 % 및 22.5 % 향상시킬 수 있습니다.

콜라겐 음료의 0.125 %, 0.25 % 및 0.5 %는 UVA 처리 된 섬유 아세포의 상대적인 콜라겐 생성 수준을 UVA 그룹과 비교하여 각각 17.9 %, 20.7 % 및 24.9 % 향상시킬 수 있습니다

그림 3). 결과는 콜라겐 음료가 48 시간 샘플 처리 후 세포 생존력의 손상을 염려하지 않고 섬유 아세포에서 콜라겐 합성 능력을 실질적이고 현저하게 향상시킬 수 있음을 나타냅니다.

 도 S4 는 24 시간 샘플 처리 후 세포의 결과와의 유사성을 나타내며 (도 2 ), 상대적 세포 생존 성의 급격한 하락 경향은 나타나지 않았다. 외래 단백질을 높은 수준 [혜택 콜라겐 합성의 효율 개선의 이론으로 설명 될 수있는 용량 의존적 인 경향 개선 효과를 준수 27]. 콜라겐 생성의 고무적인 결과 외에도 콜라겐 음료는 또한 섬유 아세포의 엘라스틴 생성을 긍정적으로 향상 시켰습니다.

콜라겐 음료의 0.125 %, 0.25 % 및 0.5 %는 대조군에 비해 섬유 모세포의 상대적 엘라스틴 생산 수준을 각각 7.9 %, 8.4 % 및 10.9 % 증가 시켰습니다.

 콜라겐 음료의 0.125 %, 0.25 % 및 0.5 %는 UVA 그룹에 비해 UVA 처리 된 섬유 아세포에서 상대적인 콜라겐 생성 수준을 각각 13.8 %, 13.8 % 및 17.6 % 향상시킬 수 있습니다

(그림 4 ).

그림 3 섬유 아세포의 콜라겐 생성 수준의 결과. CCD-966Sk 세포를 48 시간 동안 0 %, 0.125 %, 0.25 % 또는 0.5 %로 처리 한 후 UVA 관련 그룹에 대해 UVA 처리 (10 J / cm ² )를 처리했습니다. (, ) (통제 그룹에 해당 : ; ; UVA 그룹에 해당 :; ).

그림 4 섬유 아세포의 엘라스틴 생산 수준의 결과. CCD-966Sk 세포를 48 시간 동안 0 %, 0.125 %, 0.25 % 또는 0.5 %로 처리 한 후 UVA 관련 그룹에 대해 UVA 처리 (10 J / cm ² )를 처리했습니다. (, ) (통제 그룹에 해당 : ; ; UVA 그룹에 해당 :; ).

또한 ECM 관련 구성 요소 (즉, 콜라겐 (COL), 엘라스틴 (ELN) 및 히알루로 네이트 (HAS))의 유전자 발현을 분석했습니다

 (그림 5 ). 콜라겐 음료의 0.25 % 및 0.5 %는 COL1A1 , COL4A1 , ELN 및 HAS2 의 발현을 크게 상향 조절할 수 있습니다 .원래 섬유 아세포에 대한 유전자. UVA 처리 후 콜라겐 음료는 이러한 유전자 발현 수준을 긍정적으로 조절했습니다.

그러나 유전자의 개선 정도는 콜라겐 음료의 농도에 따라 다릅니다. 일반적으로 콜라겐 음료 0.25 %는 0.5 %보다 대부분의 유전자에 대해 더 나은 상향 조절 효과를 나타냅니다.

 0.5 % 콜라겐 음료 그룹에서 낮은 유전자 발현은 부분적으로 환경 스트레스 문제 때문일 수 있습니다. 세포 수준에서 콜라겐 및 엘라스틴 발현과는 달리 24 시간 시료 처리로 고유 한 유전자 발현을 명확하게 식별 할 수 있으므로 본 실험에서는 48 시간 배양 기간을 채택하지 않았습니다.

 종합 해보면, 콜라겐 음료가 실제로 콜라겐과 엘라스틴 및 관련 유전자의 발현을 상향 조절할 수 있음을 확인했습니다.

3.3. UVA로 인한 산화 스트레스

산화 스트레스는 세포 노화의 중요한 원동력입니다. 따라서 우리는 UVA로 인한 산화 스트레스 상황에서 콜라겐 음료의 항산화 능력을 연구하려고 시도했습니다

 (그림 6 및 7 ). 이전 실험을 고려할 때 개선 정도는 콜라겐 음료의 농도 증가와 양의 상관 관계가 있습니다. 콜라겐 음료 그룹의 0.25 % 및 0.5 %의 상대 ROS 수준은 각각 3.2 및 3.6 배였습니다

 (그림 6 ). UVA 그룹에 비해 콜라겐 음료는 UVA로 인한 산화 스트레스를 2.4 배 감소시킬 수 있습니다. 두 농도 모두 섬유 아세포에서 ROS 생성에 대해 유사한 억제 효과를 수행했습니다.

그림 7 은 식의 결과를 나타냅니다.SOD1 (슈퍼 옥사이드 디스 뮤 타제 1), SOD2 , CAT (카탈라제) 유전자. 콜라겐 음료의 0.5 %에서만 양성 CAT 변조가 관찰 되었음에도 불구하고, 섬유 아세포 의 SOD2 및 CAT 유전자의 상향 조절은 콜라겐 음료로 처리 한 후에 달성되었습니다 .

결과는 ROS 결과와 관련이 있습니다. 원래 세포의 경우 콜라겐 음료의 0.25 % 및 0.5 %는 SOD 1 및 SOD2 유전자 의 발현 수준을 현저하게 증가시킬 수 있습니다.

따라서 콜라겐 음료는 UVA로 인한 산화 스트레스의 영향을 완화 할 수 있습니다.

3.4. 단백질 폴딩 및 DNA 복구

미토콘드리아 활동의 감소는 노화 과정과 무수한 질병의 발병과 관련이 있습니다

[ 28 ]. 반대로 적절한 미토콘드리아 상태를 유지하는 것은 노화를 지연시키고 특정 질병의 위험을 낮추는 수단입니다. 따라서 우리는 단백질 폴딩, DNA 돌연변이 및 DNA 복구에 영향을 미칠 수있는 일부 유전자의 발현을 조사했습니다

(그림 8 및 9 ). CCT는 CCT1 CCT8 - 서브 유닛으로 구성된 (TCP1 착체를 함유하는 chaperonin) 올바른 단백질 폴딩하는 보호자 복합체이며, 그 구현은 셀 수명, 분할 및 마이그레이션 [과 연관된 29]. PTEN 유도 키나아제 1 (PINK1) / 파킨 매개 미토 파지는 파리의 미토콘드리아 DNA 돌연변이에 대한 완화 제로 인식되고 있으며 돌연변이는 신경 퇴행성 질환의 발병과 관련이 있습니다

[ 30 ]. MLH1 (mutL 상 동체 1), MSH2 (mutS 상 동체 2) 및 MSH3 는 MMR 관련 유전자이며 돌연변이로 인해 위장 암이 발생합니다 [ 31 ]. 또한 OGG1 (8-oxoguanine DNA glycosylase) 및 UNG (uracil DNA glycosylase) 유전자는 BER에 관여합니다

 [ 31 , 32 ]. 그림 8 은 CCT2 , CCT5 , CCT6A 의 발현 결과를 보여줍니다., CCT8 및 PINK1 유전자. 콜라겐 음료는 원래 세포에 대한 올바른 단백질 폴딩 및 미토 파지 활동을 분명히 향상시킬 수있는 반면 UVA 조사의 해로운 합병증은 콜라겐 음료의 개선 효과를 방해했습니다.

 그림 9 는 콜라겐 음료가 MMR 및 BER의 성능, 즉 원래 및 UVA 처리 된 섬유 아세포에서 MLH1 , MSH2 , MSH6 , OGG1 및 UNG 유전자 의 상향 조절을 크게 개선 할 수 있음을 나타냅니다 .

한마디로 콜라겐 음료는 DNA 복구 효율을 향상시킬 수 있습니다.

결과적으로 콜라겐 음료의 시너지 효과는 세포 생존력과 콜라겐 및 엘라스틴의 발현을 향상시키고, ROS 손상을 줄이며, 단백질 접힘을 개선하고 DNA 복구를 통해 섬유 아세포에서 DNA 돌연변이의 위험을 낮출 수 있습니다.

실험 결과는 세포 모델을 기반으로하고 인간의 콜라겐 음료의 정확한 이점을 완전히 반영 할 수는 없지만 (소화 시스템으로 인해) 긍정적 인 결과가 여전히 구강의 이점에 대해 더 세심한 통찰력을 가져올 수 있다고 겸손하게 믿습니다.

노화 방지를위한 콜라겐 음료. 특히 콜라겐 음료의 콜라겐 함량 (12 %)은 다른 연구에 따라 실제 임상 효능을 발휘할 수 있습니다 [ 33 ].

4. 결론

이 연구는 ROS 억제, ECM 단백질 합성 촉진, 단백질 폴딩 및 DNA 복구 개선에 대한 어류 가수 분해 콜라겐 음료의 포괄적 인 노화 방지 효과를 보여줍니다. 세포 행동의 결과는 콜라겐 음료가 세포 생존력을 향상시키고 콜라겐과 엘라스틴 합성을 촉진 할 수 있음을 나타냅니다.

또한 분자 결과는 콜라겐 음료가 ECM 단백질 합성, 항산화 효소, 단백질 폴딩, DMR 및 BER과 관련하여 유전자 발현을 향상시킬 수 있음을 나타냅니다.

한마디로, 생선 콜라겐 음료는 노화 매개 변수를 방해하고 인간 섬유 아세포의 산화 손상과 생리적 손실을 보상함으로써 피부 노화를 지연시키는 시너지 효과를 발휘합니다!

데이터 가용성

저자는이 연구의 주요 결과에 대한 모든 실험 결과가 기사 및 보충 자료에서 사용 가능함을 확인했습니다.

이해 상충

저자는이 작업에 대해 이해 상충이 없다고 주장했습니다.

감사의 말

재료 지원에 대해 Zhejiang Kazman Biotechnology Co.와 기술 지원에 대해 TCI Gene Inc.에게 감사드립니다.

보충 자료

보충 자료 그림 1. 24 시간 동안 콜라겐 음료의 다른 농도로 치료 후 섬유 아세포의 광학 이미지. 그림 2. 섬유 아세포의 세포 생존력 결과. (A) CCD-966Sk 세포는 UVA 처리 (10 J / cm2) 후 24 시간 동안 0 %, 0.125 %, 0.25 % 또는 0.5 %로 처리되었습니다. (B) 0.125 %, 0.25 % 또는 0.5 % 콜라겐 음료의 CCD-966Sk 세포를 UVA (10 J / cm2)로 처리 한 다음 24 시간 배양했습니다. (, ) (대조군에 해당 : ; UVA 그룹에 해당 :) 그림 3. 섬유 아세포에서 미토콘드리아 활동의 유세포 분석 패턴 및 형광 이미지의 결과. CCD-966Sk 세포를 JC-1 염료 (적색 신호)로 처리하여 섬유 아세포에서 미토콘드리아 활성을 평가하고 이들의 신호를 P1 영역에서 세포 신호의 비율로 유세포 분석으로 분석했으며, 이는 1의 비율로 정의되었습니다. (FITC 채널의 녹색 신호) : 1 (PE-A 채널의 빨간색 신호). (A, I) 통제. (B, J) 0.125 % 콜라겐 음료. (C, K) 0.25 % 콜라겐 음료. (D, L) 0.5 % 콜라겐 음료. (E, M) UVA 만 해당. (F, N)콜라겐 음료. (가다)콜라겐 음료. (H, P)콜라겐 음료 그림 4. 섬유 아세포의 세포 생존력 결과. CCD-966Sk 세포는 48 시간 동안 0.125 %, 0.25 % 또는 0.5 %로 처리되었습니다. (, ) ( 보충 자료 )

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출처 : 생명과학 저널 HINDAWI

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